非洲豬瘟病毒熒光PCR快速檢測試劑盒說明書

                                       獸用

【獸藥名稱】

通用名稱：非洲豬瘟病毒熒光PCR快速檢測試劑盒

商品名稱：無

漢語拼音：Feizhouzhuwenbingdu Yingguang PCR Kuaisu Jiance Shijihe

英文名稱：Real-time PCR for Rapid Detection of African Swine Fever Virus

【主要成分與含量】

【作用與用途】本試劑盒適用于豬血液、豬肉組織關註、淋巴結(jié)增多、脾臟等樣本中非洲豬瘟病毒核酸的檢測滿意度。

【用法與判定】

1 用法

1.1 樣品處理及模板準備

1.1.1 樣品處理

·組織樣品處理：分別從豬肉組織不容忽視、淋巴結(jié)重要的作用、脾臟不同位置取樣提單產，用手術(shù)剪剪碎混勻后取0.1g于研磨器中研磨促進善治，加入1.5ml生理鹽水繼續(xù)研磨，待勻漿后轉(zhuǎn)至1.5ml無菌離心管趨勢，12000 r/min離心2分鐘有力扭轉，取上清200μl備用。

·血液樣品無需處理相互配合，取200μl備用慢體驗。

1.1.2 模板準備

·根據(jù)不同的樣本類型，按照下表準備相應(yīng)的樣本用量智能化。

·將樣本加入到1.5 ml離心管中科技實力，加入下表推薦體積的Solution A，渦旋震蕩20 s建設，并按照下表推薦的處理方法在此基礎上，室溫靜置3-5 min，或95℃金屬浴振蕩孵育3-5 min前來體驗。

·樣本充分裂解后（95℃金屬浴振蕩孵育的樣本需恢復(fù)室溫）提供有力支撐，加入下表推薦體積的Solution B，并渦旋震蕩30 s建議，12000rpm離心2min品率，上清即為模板DNA。

·處理后的樣本如在2小時內(nèi)進行下一步試驗不斷發展，請于4℃保存積極影響，如不能立即進行下一步試驗，請于-20℃保存緊密協作。

備注：組織樣本加入10倍體積的生理鹽水制成組織勻漿液后，可按照血液樣本的處理方法進行處理發揮重要作用。

1.1.3可利用商品化試劑盒提取核酸進行反應(yīng)醒悟，效果更佳

1.2 熒光PCR擴增

1.2.1 試劑準備

實驗前20分鐘將試劑從冰箱取出并恢復(fù)至室溫，使其*融化高質量，充分混勻后瞬時離心去除管壁吸附液體也逐步提升。

1.2.2 配制反應(yīng)體系

按下表1體系，在配套PCR管中配制反應(yīng)體系註入了新的力量，蓋緊管蓋后瞬時離心10秒重要的作用，轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。

表1  PCR反應(yīng)體系

1.2.3 PCR擴增

快速模式

表2 儀器PCR擴增參數(shù)

2 判定

2.1 合理調(diào)整閾值線足夠的實力，不同儀器可根據(jù)儀器噪音情況進行調(diào)整。

2.2 試劑盒有效性判定

·陰性對照：無Ct值結構，線形為直線或微斜更適合，無明顯指數(shù)增長聽得懂。

·陽性對照：Ct值≤30，有明顯指數(shù)增長高質量發展，呈典型的S型曲線便利性。

2.3 樣本結(jié)果判定

·樣本檢測結(jié)果Ct值≤38，有明顯指數(shù)增長重要平臺，判定為陽性深刻認識，表明樣本中檢測出非洲豬瘟病毒。

·樣本檢測結(jié)果38＜Ct≤40應用提升，判定為可疑主動性。應(yīng)對樣本進行復(fù)測，若復(fù)測結(jié)果Ct值仍在38~40之間發展的關鍵，有明顯指數(shù)增長道路，則判定為陽性，否則為陰性真諦所在。

·樣本檢測結(jié)果無Ct值指導，判定為陰性，表明樣本中未檢測出非洲豬瘟病毒充分。

【注意事項】

（1）實驗前請仔細閱讀本試劑盒說明書進一步完善，嚴格按步驟執(zhí)行，不使用本試劑盒提供的組份或不按照說明書進行實驗可能導(dǎo)致錯誤結(jié)果競爭力。

（2）所有試劑應(yīng)在規(guī)定溫度儲存調整推進。-20℃保存的試劑在使用前應(yīng)充分混勻。試劑盒反復(fù)凍融次數(shù)不宜超過5次機製性梗阻。

（3）實驗操作應(yīng)按照國家有關(guān)臨床基因擴增實驗室管理規(guī)范執(zhí)行機製，實驗過程應(yīng)分區(qū)（試劑準備區(qū)、樣本制備區(qū)集成應用、核酸擴增區(qū)）探討，各區(qū)物品為，不得交叉使用高效流通，避免污染調解製度。

（4）操作臺、移液器有效性、離心機等儀器用品應(yīng)經(jīng)常用1%次氯酸鈉創新內容、75%乙醇或紫外燈進行消毒。耗材應(yīng)進行無酶處理廣泛關註。

（5）待檢樣本、試劑盒組份及實驗中的廢棄物需按照具有潛在傳染性物質(zhì)處理方法進行處理共創輝煌。

（6）為防止熒光干擾具有重要意義，應(yīng)避免使用含熒光物質(zhì)的手套進一步，避免用手直接接觸，預(yù)防交叉污染強大的功能。

（7）檢測結(jié)果為陰性實際需求，并不*代表為非感染狀態(tài)，具體診斷需結(jié)合獸醫(yī)臨床優勢。

（8）產(chǎn)生假陰性的可能原因為：待檢樣本在采集善謀新篇、運輸、保存及核酸提取過程中操作不當造成DNA降解便利性；樣本中核酸濃度低于低檢測限方法；病毒待測靶基因出現(xiàn)變異；未經(jīng)驗證的其他干擾因素提供有力支撐。

（9）產(chǎn)生假陽性的可能原因為：待檢樣本采集切實把製度、運輸及核酸提取過程中發(fā)生交叉污染。

【規(guī)格】 50反應(yīng)/盒

【貯藏及有效期】 試劑盒-20℃以下冷凍避光保存自行開發，有效期為12個月進行部署。

【生產(chǎn)企業(yè)】 廣州悅洋生物技術(shù)有限公司

僅供獸醫(yī)診斷使用