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Technical articles養(yǎng)殖場(chǎng)用非洲豬瘟檢測(cè)試劑盒也可用于環(huán)境檢測(cè)非洲豬瘟試劑盒由風(fēng)途科技為您供應(yīng)。養(yǎng)殖場(chǎng)用非洲豬瘟檢測(cè)試劑盒也可用于環(huán)境檢測(cè)非洲豬瘟試劑盒均已經(jīng)獲得農(nóng)業(yè)農(nóng)村產(chǎn)品批準(zhǔn),可以滿足非洲豬瘟核酸現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)需求傳遞∽詣踊??啥靠焖傩竽令?lèi)疾病診斷如非洲豬瘟、聽得懂、豬瘟預期、豬藍(lán)耳競爭力、偽狂犬等疾病智能化,廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖場(chǎng)科技實力、屠宰場(chǎng)、食品加工廠建設、肉產(chǎn)品深加工企業(yè)重要的、農(nóng)業(yè)農(nóng)村、畜牧姿勢、檢驗(yàn)檢疫單位使用相互融合。
【產(chǎn)品名稱(chēng)】
通用名稱(chēng):非洲豬瘟病毒熒光PCR核酸檢測(cè)試劑盒(PCR熒光探針?lè)ǎ?/span>
英文名稱(chēng):Diagnostic Kit for African Swine Fever Virus (PCR Fluorescence Probing)
[預(yù)期用途]
本試劑盒主要用于檢測(cè)疑似感染豬抗凝血及臨床病料中的非洲豬瘟病毒(ASFV, African Swine Fever
Virus)核酸,適用于非洲豬瘟病毒的檢測(cè)綠色化、輔助診斷和流行病學(xué)調(diào)查不同需求。
【試劑盒組分】
1、試劑盒組成及貯藏條件
名稱(chēng) | 50 T | 貯藏條件 |
1保持穩定、反應(yīng)液A | ImL | -20°C |
2總之、反應(yīng)液B | ImL | |
3、陽(yáng)性對(duì)照 | 250μL | |
4支撐作用、陰性對(duì)照 | 250μL | |
5研學體驗、PCR反應(yīng)液 | 850μL | |
6、酶混合液 | 150μL |
2最為突出、需自備材料:生理鹽水落實落細、無(wú)菌槍頭、熒光PCR反應(yīng)管高效化、記號(hào)筆等製高點項目。
【操作步驟】
一、樣品制備
1範圍和領域、 血液樣品:采集抗凝血(抗凝劑為EDTA)或血清樣品認為,編號(hào)備用。
2新趨勢、 組織樣品:采集脾臟反應能力、肝臟、淋巴結(jié)學習、扁桃體等病變組織樣品或軟蜱0.1g(黃豆粒大薪Y構重塑。劭萍艏羲橛诮M織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨應用優勢,再加1mL生理鹽水混勻高質量發展,4°C條件下8000 rpm/分鐘離心2分鐘,取上清液于滅菌離心管中高效節能,編號(hào)備用影響力範圍。
二大局、DNA提取
取反應(yīng)液A 20μL分別加入到新的1.5mL離心管,加入抗凝而或血清或組織上清液2μL混勻不合理波動,室溫(20°C左右)靜置3分鐘宣講手段,加入反應(yīng)液B 20μL,吹打混勻即可,若為抗凝全血積極拓展新的領域,則需8000rpm/分鐘再離心2分鐘后做為待檢DNA溶液配套設備。
二、PCR擴(kuò)增
1相對開放、配液:取出PCR反應(yīng)液推進高水平、酶混合液,在室溫*融化后拓展應用,充分混勻生產創效,瞬離,可將酶混合液全取岀直接加入到PCR反應(yīng)液中管理,充分混勻橫向協同,瞬離后按每份20μL分裝使用;或按照每份PCR反應(yīng)液17μL, 酶混合液3μL的比例取一定的試驗(yàn)用量敢於挑戰,混合兩種反應(yīng)液,瞬離后按照每份20μL分裝到熒光PCR 反應(yīng)管中不斷創新,剩余試劑立即凍存;(操作過(guò)程要注意避光)
2提供了遵循、加樣擴(kuò)增:分別向上述PCR反應(yīng)管中加入5μL樣本 DNA或陰性對(duì)照或陽(yáng)性對(duì)照參與水平,混勻并瞬離, 放入熒光PCR儀上運(yùn)行以下程序:
步驟 | 條件 | 循環(huán)數(shù) |
UNG處理 | 50°C: 2分鐘 | 1 |
預(yù)變性 | 95°C: 3分鐘 | 1 |
預(yù)擴(kuò)増 | 95°C: 8 秒 55C: 8 秒 | 5 |
PCR擴(kuò)增 | 95°C: 8 秒 55°C: 8 秒 | 40 |
熒光通道選擇FAM,在40循環(huán)階段每個(gè)循壞的55°C時(shí)收集熒光信號(hào)。設(shè)置擴(kuò)增體系為25μL,同時(shí)要選擇 passive reference 和 quencher 為 none 的模式服務效率。
(注:若熒光PCR儀(如ABI7500)按說(shuō)明書(shū)中的反應(yīng)程序設(shè)置后因持溫時(shí)間短無(wú)法運(yùn)行,可將預(yù)擴(kuò)增和PCR擴(kuò)增條件變更為95°C: 5秒 55°C:30秒明確相關要求。)