非洲豬瘟檢測試劑盒備案即非洲豬瘟病毒熒光等溫擴增檢測試劑盒由風(fēng)途科技為您提供，F(xiàn)T-ZWSJ01創新為先，風(fēng)途誠心經(jīng)營開放以來，堅決不做不良商家對外開放。搭配風(fēng)途出品的非洲豬瘟檢測儀落地生根，高效又準(zhǔn)確過程中。

　　本試劑盒主要用于檢測疑似感染豬抗凝血及臨床病料中的非洲豬瘟病毒(ASFV, African Swine FeverVirus)核酸兩個角度入手，適用于非洲豬瘟病毒的檢測去創新、輔助診斷和流行病學(xué)調(diào)查成效與經驗。

　　【操作步驟】

　　一適應性、樣品制備

　　1、 血液樣品：采集抗凝血(抗凝劑為EDTA)或血清樣品稍有不慎，編號備用重要作用。

　　2、 組織樣品：采集脾臟最為顯著、肝臟尤為突出、淋巴結(jié)、扁桃體等病變組織樣品或軟蜱0.1g(黃豆粒大小)穩定，眼科剪剪碎于組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨改造層面，再加1mL生理鹽水混勻，4°C條件下8000 rpm/分鐘離心2分鐘優勢與挑戰，取上清液于滅菌離心管中經驗分享，編號備用。

　　二趨勢、DNA提取

　　取反應(yīng)液A 20μL分別加入到新的1.5mL離心管有力扭轉，加入抗凝而或血清或組織上清液2μL混勻，室溫(20°C左右)靜置3分鐘相互配合，加入反應(yīng)液B 20μL,吹打混勻即可慢體驗，若為抗凝全血，則需8000rpm/分鐘再離心2分鐘后做為待檢DNA溶液智能化。

　　二科技實力、PCR擴增

　　1、配液：取出PCR反應(yīng)液建設、酶混合液在此基礎上，在室溫*融化后，充分混勻前來體驗，瞬離自主研發，可將酶混合液全取岀直接加入到PCR反應(yīng)液中確定性，充分混勻，瞬離后按每份20μL分裝使用;或按照每份PCR反應(yīng)液17μL, 酶混合液3μL的比例取一定的試驗用量損耗，混合兩種反應(yīng)液,瞬離后按照每份20μL分裝到熒光PCR 反應(yīng)管中講故事，剩余試劑立即凍存;(操作過程要注意避光)

　　2、2性能穩定、加樣擴增：分別向上述PCR反應(yīng)管中加入5μL樣本 DNA或陰性對照或陽性對照全面革新，混勻并瞬離, 放入熒光PCR儀上運行。

　　熒光通道選擇FAM,在40循環(huán)階段每個循壞的55°C時收集熒光信號越來越重要。設(shè)置擴增體系為25μL,同時要選擇 passive reference 和 quencher 為 none 的模式線上線下。

　　(注:若熒光PCR儀(如ABI7500)按說明書中的反應(yīng)程序設(shè)置后因持溫時間短無法運行,可將預(yù)擴增和PCR擴增條件變更為95°C： 5秒 55°C：30秒。)

　　【結(jié)果判定】

　　1醒悟、 基線和閾值設(shè)定;基線調(diào)整取6-15個循環(huán)的熒光信號數據顯示，閾值設(shè)定以閾值線剛好超過陰性對照檢測 熒光曲線的高點為原則°

　　2、 質(zhì)量控制：反應(yīng)結(jié)束后也逐步提升，陰性對照的檢測結(jié)果應(yīng)無特定的擴增曲線記得牢，Ct值為>38或無;陽性對照 的Ct值應(yīng)≤30.0,且明顯的擴增曲線;否則實驗視為無效。

　　3重要的作用、 樣品判定：待檢樣品熒光信號有指數(shù)型增加更多可能性，且結(jié)果顯示Ct值<35.O,報告為陽性;未檢測到Ct 值或Ct值>38或無明顯擴增曲線，則樣品判定為陰性足夠的實力。35≤Ct值#8時緊迫性，復(fù)檢一次，重復(fù)結(jié)果為陽性者判定為陽性更適合，否則判定為陰性聽得懂。

　　【注意事項】

　　1、實驗前請仔細閱讀本試劑盒說明書高質量發展，嚴(yán)格按照操作步驟執(zhí)行全方位，在操作過程中對時間、試劑體積等控制可以獲得好的結(jié)果影響力範圍。

　　2大局、 實驗室應(yīng)嚴(yán)格按照有關(guān)規(guī)定分區(qū)管理。各區(qū)間人員邁出了重要的一步、器材有序推進、試劑及空氣流向應(yīng)有產(chǎn)格要求。

　　3需求、 有關(guān)耗材確保潔凈道路、無菌，核酸提取完成后盡快進入下一步試驗或冷凍保存真諦所在。

　　4指導、預(yù)混后的試劑應(yīng)盡量在短期內(nèi)使用完畢，戶外使用應(yīng)在加冰袋的泡沫盒保存充分，每日試驗完畢應(yīng)及時 冷凍保存進一步完善。

　　5、 對于熒光PCR管要避免徒手或使用過的手套接觸競爭力，檢測過程中使用不帶熒光物質(zhì)一次性乳膠手套調整推進。

　　6、 凍存試劑使用前應(yīng)于室溫下*融化機製性梗阻，充分混勻機製，瞬時離心使液體*沉于管底。

　　7集成應用、 樣品探討、陰性對照封蓋后，在通風(fēng)環(huán)境添加陽性對照并及時封蓋高效流通，避免組分間及氣溶膠等假陽性污染°

　　8調解製度、 擴增反應(yīng)完畢后的PCR管嚴(yán)禁開蓋,應(yīng)和試驗產(chǎn)生的其它廢棄物一起及時收集,遠離PCR實驗室 進行無害化處理。

　　【規(guī)格】50頭份/盒功能。

　　【貯藏與有效期】-20°C以下避光保存應用的因素之一，有效期12個月。